Ro-ràdh bunaiteach
Is e erythrocyte lysate aon de na dòighean as sìmplidh agus as fhasa gus ceallan fala dearga a thoirt air falbh, is e sin, a bhith a 'sgoltadh ceallan fala dearga le lysate, nach eil a' dèanamh cron air ceallan neònach agus a bheir air falbh ceallan fola dearga gu tur. Is e dòigh toirt air falbh ceallan fala dearga tlàth a th’ ann an Lysate cleavage, a thathas a’ cleachdadh sa mhòr-chuid airson sgaradh agus glanadh cheallan clò air an sgapadh le cnàmhadh enzyme, dealachadh agus glanadh lymphocytes, agus toirt air falbh ceallan fala dearga ann an deuchainnean pròtain clò agus niuclasach. toirt a-mach searbhag. Chan eil ceallan fala dearga anns na ceallan clò a gheibhear le lysate ceallan fala dearga, agus faodar an cleachdadh tuilleadh airson cultar bun-sgoile, fusion cealla, cytometry sruthadh, dealachadh agus toirt a-mach searbhag niuclasach agus pròtain, msaa.
Stiùireadh airson a chleachdadh
Sampall cealla ìnean
1. Bha stuthan ùra air an cladhach le pancreas/enzyme no collagenase agus air an sgapadh a-steach do chasg aon-chealla, agus chaidh an supernatant a thilgeil air falbh le centrifugation.
2. Thoir ELS lysate bhon fhrigeradair aig 4, cuir ELS lysate ris an fhrasadh cealla ann an co-mheas 1: 3-5 (cuir 3-5ml de lysate gu 1ml de chealla teann), sèideadh gu socair agus measgachadh.
3. Centrifuge aig 800-1000rpm airson 5-8 mionaidean agus cuir às don leaghan soilleir dearg àrd.
4. Chaidh am pàirt precipitated a chruinneachadh agus a mheadhanachadh le fuasgladh Hank no fuasgladh cultar gun serum airson 2-3 uair.
5, mura h-eil an sgàineadh coileanta / coileanta faodar ceumannan 2 agus 3 ath-aithris.
6. Resuspension ceallan airson deuchainnean às dèidh sin; Ma thèid RNA a thoirt a-mach, tha e nas fheàrr sin a dhèanamh anns an fhuasgladh a chaidh ullachadh bho Cheum 4 a’ cleachdadh uisge DEPC
Tha cearcall-beatha glè ghoirid aig ceallan fala dearga, dìreach 120 latha, ach bidh iad a’ gintinn fuil gu math luath, agus sa chùis seo tha iad gu sònraichte comasach air roinneadh cealla, agus is iadsan na ceallan roinneadh as luaithe dhiubh uile, agus mar sin tha an cealla seo glè luachmhor, mar sin tha e glè fheumail airson cultar cealla. Tha e gu math sìmplidh, chan eil organelles ann, dìreach membran cealla agus pròtanan.