Tha uidheamachd ELISA stèidhichte air ìre chruaidh de antigen no antibody agus bileagan enzyme air antigen no antibody. Tha an antigen no an antibody a tha ceangailte ri uachdar an neach-giùlain cruaidh fhathast a’ cumail a ghnìomhachd imdhun-eòlach, agus tha an enzym leis an ainm antigen no antibody a’ cumail an dà chuid a ghnìomhachd imdhun-eòlach agus gnìomhachd an einnsein. Aig àm an dearbhaidh, bidh an sampall fo dheuchainn (anns a bheil an antibody no antigen air a thomhas) ag ath-fhreagairt leis an antigen no an antibody air uachdar an neach-giùlain cruaidh. Tha an toinnte antigen-antibody a chaidh a chruthachadh air a’ ghiùlan cruaidh air a sgaradh bho stuthan eile san leaghan le bhith a ’nighe.
Bithear a’ cur antigens no antibodies le bileag enzyme, a bhios cuideachd a’ ceangal ris a’ ghiùlan cruaidh le bhith a’ freagairt. Aig an àm seo, tha an ìre de enzyme anns an ìre chruaidh a rèir na tha de stuth anns an sampall. Às deidh an t-substrate den ath-bhualadh enzyme a chuir ris, tha an t-substrate air a chatalachadh leis an enzyme gu bhith na thoraidhean dathte. Tha meud an toraidh ceangailte gu dìreach ris an ìre de stuth a chaidh a dhearbhadh anns an sampall, agus mar sin faodar mion-sgrùdadh càileachdail no cainneachdail a dhèanamh a rèir doimhneachd an dath.
Tha èifeachdas àrd catalytic enzymes gu neo-dhìreach ag àrdachadh toraidhean an fhreagairt dìon, a’ dèanamh an assay gu math mothachail. Faodar ELISA a chleachdadh gus antigens a dhearbhadh, ach faodar a chleachdadh cuideachd airson antibodies a dhearbhadh.
Prionnsabalan bunaiteach kit ELISA
Bidh e a’ cleachdadh ath-bhualadh sònraichte de antigen agus antibody gus an nì a cheangal ri enzyme, agus an uairsin a’ toirt a-mach freagairt dath eadar enzyme agus substrate airson dearbhadh cainneachdail. Faodaidh an rud tomhais a bhith antibody no antigen.
Tha trì ath-bheachdan riatanach san dòigh co-dhùnaidh seo:
â Antigen ìre solid no antibody (sorbent dìonachd)
â¡ Enzyme le ainm antigen no antibody (comharra)
â ¢ substrate airson gnìomh enzyme (àidseant leasachadh dath)
Anns an tomhas, tha an antigen (antibody) an-toiseach ceangailte ris a 'ghiùlan cruaidh, ach tha e fhathast a' cumail a ghnìomhachd dìon, agus an uairsin tha co-luachadh (comharradh) de antibody (antigen) agus enzyme air a chur ris, a tha fhathast a 'gleidheadh a ghnìomhachd dìon tùsail agus an enzyme. gnìomh. Nuair a bhios an conjugate ag ath-fhreagairt leis an antigen (antibody) air a’ ghiùlan chruaidh, thèid an substrate co-fhreagarrach den enzyme a chur ris. Is e sin, hydrolysis catalytach no ath-bhualadh agus dath REDOX.
Tha an dubhar dath a bhios e a’ dèanamh a rèir na tha de antigen (antibody) ri thomhas. Faodar an toradh dathte seo fhaicinn leis an t-sùil rùisgte, faodar microsgop optigeach, miocroscop dealanach, a thomhas cuideachd le speactrophotometer (ionnstramaid leubail enzyme). Tha an dòigh sìmplidh, goireasach, luath agus sònraichte.